4-羟基苯乙烯基吡啶为HRP底物的酶荧光免疫传感体系测定布氏杆菌抗体

本文合成了一种新型辣根过氧化物酶（HRP）荧光底物—4-羟基苯乙基吡啶（pHSP）,并首次将它运用于酶联荧光免疫传感体系。对pHSP化学性质的研究证实，pHSP在空气中较稳定，对HRP、H2O2的荧光响应性能优于传统HRP荧光底物如对羟苯乙酸、AmplexRed和佳味醇等。pHSP本身只有极弱的荧光，在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物，该二聚体在300nm的激发光下能发射波长为437nm的强荧光，并且反应体系的荧光增加与HRP量在一定浓度范围内成线形相关。根据此原理，建立了兔布氏杆菌抗体的酶联荧光传感分析新方法。运用制备的传感装置测定兔布氏杆菌抗体的线形范围为1？10-5？1.6？10-3g/L，抗体检出限为1？10-5g/L，相对标准偏差为4.1%（n=11）。pHSP的二聚体产物水溶性很低，利用设计的装置较好地解决了传统测定溶液体系方法灵敏度打折的问题。