木瓜蛋白酶的化学修饰及对其酶活力的影响

用不同酸酐对木瓜蛋白酶进行化学修饰,以三硝基苯磺酸法(TNBS)测定修饰酶的平均氨基修饰度,对修饰前后的木瓜蛋白酶分别纯化并通过UV-vis和IR对其结构进行了表征.考察了温度、pH值和表面活性剂SDS对化学修饰的木瓜蛋白酶活力的影响,并与天然木瓜蛋白酶进行了比较,对天然酶和修饰酶进行了动力学研究.结果表明,化学修饰木瓜蛋白酶的最适反应温度为80℃;最适pH值为9.0;在SDS浓度为5mg？mL－1时修饰酶酶活仍能保持在50%左右;在所有酶中,均苯四甲酸酐修饰木瓜蛋白酶的催化效率最高,为2.442×102.与天然木瓜蛋白酶相比,化学修饰木瓜蛋白酶的热稳定性、耐碱性和耐洗涤性得到了显著提高.