Au纳米标记物增强电化学免疫分析大肠杆菌的研究

通过在Au纳米颗粒表面修饰辣根过氧化酶(HRP)标记的大肠杆菌抗体制备了一种新型的Au纳米标记物,并将该纳米标记物应用于增强电化学免疫分析大肠杆菌.经过酶联免疫反应后,Au纳米标记物、免疫磁性颗粒(IMB)和大肠杆菌形成了IMB/抗体-大肠杆菌-Au纳米标记物的三明治式免疫复合物.以3,3,5,5-四甲基联苯二胺(TMB)溶液作为底物,采用电化学与流动注射检测(FIA)相结合的技术测定HRP的活性.检测到的电流大小与免疫复合物上HRP的量成正比,从而与大肠杆菌的浓度成正比.Au纳米颗粒增加了HRP的负载量,增强了电化学信号,大大提高了大肠杆菌的检测灵敏度.实验结果表明,大肠杆菌浓度在1.0×102～5.0×104cfu？mL－1范围内与电流大小成线性相关,最低检测限达50cfu？mL－1,若对大肠杆菌样品溶液进行预浓缩,将得到更宽的检测范围和更低的检测限.本方法总的分析时间比其他方法短,在1h内就能完成对大肠杆菌样品的快速检测.