适体修饰纳米金催化-共振散射光谱测定凝血酶

用核酸适体修饰纳米金制备了识别凝血酶(TB)的适体修饰纳米金(AptAu)共振散射光谱探针.在pH7.40的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中及NaCl,KCl存在下,AptAu探针中的适配体特异识别凝血酶,生成稳定的G-四分体和大粒径的纳米金聚集体.经微孔滤膜过滤后,纳米金聚集体被分离,以滤液中未反应的AptAu作催化晶种,在20.0μg/mLHAuCl4-5.01mmol/LHCl-1.83mg/mLCTMAB-50.1μg/mLVC条件下,催化维生素C(VC)还原HAuCl4生成较大粒径的金颗粒,体系在600nm处有一共振散射峰.随着凝血酶浓度的增大,滤液中AptAu浓度降低,催化作用减弱,600nm处的共振散射峰降低,其降低值ΔI600nm与凝血酶浓度在6.40×10－3～0.150U/mL范围内存在良好线性关系,回归方程为ΔI＝1.26×103C＋1.50,相关系数为0.999,检出限为1.30×10－3U/mL.该法用于定量分析人血浆中凝血酶,结果满意.