非标记纳米银探针催化共振散射光谱检测痕量ATP

在pH7.8Tris-HCl缓冲液中,三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)的核酸适体(Apt1)与其互补链(Apt2)结合生成双链DNA(double-strandDNA,dsDNA).此dsDNA不能稳定纳米银(AgNP),NaCl可致AgNP聚集,在500nm波长处产生一个较强的共振散射峰.加入ATP后,ATP与dsDNA中的Apt1结合形成较稳定的发夹结构结合物并释放出可稳定AgNP的Apt2.随着ATP浓度(16.5～1650nmol/L)增加,生成的Apt2增加,被Apt2稳定的AgNP即AgNP-Apt2结合物增加,聚集的AgNP减少,500nm处的共振散射值线性减小.该适配体反应中的AgNP-Apt2对葡萄糖-铜(II)微粒反应具有较强的催化作用,其产物氧化亚铜微粒在610nm处有一较强共振散射峰.随着ATP浓度增大,反应液中AgNP-Apt2增多,催化作用增强,610nm处的共振散射峰增强.ATP浓度在4.95～165nmol/L范围内与共振散射增大值ΔI610nm呈线性关系,检出限为1.8nmol/LATP.据此建立了灵敏度高、选择性好、简便快速检测ATP的共振散射光谱新方法.