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ISSN: 2333-9721
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化学学报  2013 

光动不对称加氢制备高光学纯度(S)-4-三甲基硅基-3-丁炔-2-醇的研究

DOI: 10.6023/A13030249, PP. 1064-1070

Keywords: 光动不对称加氢,(S)-氧化还原酶,(R)-氧化还原酶,4-三甲基硅基-3-丁炔-2-酮,(S)-4-三甲基硅基-3-丁炔-2-醇

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Abstract:

高光学纯度的(S)-4-三甲基硅基-3-丁炔-2-醇是一种重要的药物手性中间体.以4-三甲基硅基-3-丁炔-2-酮作为模型底物,从51株不产氧光合细菌中筛选出一株高效目标功能菌株ThiocapsaroseopersicinaSJH001作为生物催化剂进行光动不对称加氢催化反应,在未经优化的反应条件下,其产物(S)-TMSBL的ee值高于99%,产率高达80%以上.从ThiocapsaroseopersicinaSJH001分离得到了新的NADPH依赖型氧化还原酶[(S)-氧化还原酶和(R)-氧化还原酶].粗酶经硫酸铵分级沉淀、Q-sepharose阴离子交换层析、SephacrylS-200丙烯葡聚糖凝胶过滤层析后在SDS-PAGE上显示为单一条带,其酶蛋白的相对分子质量为44.5kDa,相对酶活为449.8U/mg,高于文献报道的同类具有对映体选择性氧化还原酶.通过比较光照强度、pH值、反应前对菌体细胞热预处理、底物浓度对ThiocapsaroseopersicinaSJH001胞内氧化还原酶的活性和构型产生的影响,进一步在分子水平阐明了光动不对称加氢催化反应的机理.

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