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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
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基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析
DOI: 10.6023/A13091013, PP. 1620-1624
Keywords: 荧光偏振,蛋白激酶A,磷酸化,TiO2纳米棒,抑制剂筛选
Abstract:
利用TiO2纳米棒与磷酸化肽的特异性相互作用，基于荧光偏振检测，建立了快速、简便的高灵敏度蛋白激酶活性分析方法.在蛋白激酶催化作用下，荧光标记的肽底物被磷酸化，磷酸化的荧光肽通过磷酸基团特异性结合在TiO2纳米棒表面，从而使底物肽上标记的荧光分子的旋转速率发生改变，通过对荧光偏振度进行测量，可实现蛋白激酶活性的定量检测，该方法对蛋白激酶A(PKA)的检出限可达0.0004U·μL-1.此外，该方法还成功用于PKA抑制剂H-89的检测，在基于蛋白激酶抑制剂的靶向药物筛选方面具有很好的应用前景.
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