杜氏盐藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆和分析

为研究杜氏盐藻(Dunaliellasalina)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvatecarboxylase,PEPC)基因的功能,根据莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)、拟南芥(Arabidopsisthaliana)、花生(Arachishypogaea)等真核生物PEPC基因高度保守序列,设计一对简并引物,通过RT-PCR的方法获得杜氏盐藻PEPC基因部分序列,然后采用RACE的方法分别克隆到5′端和3′端序列,拼接后得到全长cDNA,其长度为3523bp,包含2949bp的完整开放阅读框,编码982个氨基酸,相对分子质量为110560.5。氨基酸序列与已知物种PEPC序列的同源性依次为:Chlamydomonasreinhardtii69%,Chlorellavariabilis55%,Ostreococcustauri50%和OstreococcuslucimarinusCCE990149%,表明所克隆的序列确为杜氏盐藻PEPCcDNA序列。