嗜水气单胞菌S层缺失突变株的构建

将含有转座子Tn5的自杀性质粒pZJ25,用滤膜接合法从大肠杆菌S17株中转移到有S层的嗜水气单胞菌J-1株。通过卡那霉素抗性筛选出嗜水气单胞菌Tn5转移接合体。用嗜水气单胞菌TF7株S蛋白抗体作点印迹免疫酶分析,从转移接合体中检测到一株S蛋白阴性的菌株,命名为TM6。经检测TM6的生理生化特性与J-1株基本相同,也能产生HEC毒素和蛋白酶,但超薄切片中未见S层结构。用菌体的酸性甘氨酸抽提物作SDS-PAGE,缺少S蛋白相应条带。用J-1株S蛋白抗血清作免疫转印,亦为阴性结果。表明TM6是一株S层缺失突变的嗜水气单胞菌。