体外培养伊氏锥虫的可变表面糖蛋白的分离与鉴定

体外培养后分离出的3个伊氏锥虫变异群体,经环磷酰胺处理大鼠(CY大鼠)扩增收虫。虫体纯化后超声波裂解,超速离心制成可溶性抗原,经SephadexG-50脱盐和DE-52离子交换层析提纯可变表面糖蛋白(VSG)。经SDS-PAGE鉴定,所提纯的3个VSG分子量均为40500。用日立835-50型高速氨基酸组成分析仪分析,3个VSG均由Asp,Pro,Thr,Ser,Glu,Gly,Ala,Cys,Val,Met,Ile,Leu,Tyr,Phe,Lys,His,Arg共17种氨基酸组成,但在组成比例上差异明显,尤其表现在Pro,Met,Leu,Ile.Tyr和Clu。经Westernblot-ting鉴定,提纯的3种VSG是3种不同的特异性抗原。