南方鲇GK基因片段的克隆及序列分析 (动物科学)

为从南方鲇（Sihunlsmeridionalis）中扩增葡萄糖激酶（GK）基因，根据已报道的GK基因结构中的氨基酸保守区域，设计简并引物；从南方鲇肝胰脏中迅速抽提RNA，将扩增出的产物克隆到(pMD18-T载体上并导入到大肠杆菌DH5a中；阳性克隆鉴定后测序。将测序得到的南方鲇GK基因与已知的GK基因进行核苷酸序列比较，结果表明其与鲤（Cyprinuscarpio）的同源性较高，达到83%；将此基因片段与其他已知的JK基因做出进化关系的确定，用SPhylip(软件NJbootstrap方法构建GK系统树，它与草鱼（Ctenopahryngodonidellus）、鲤、鲫（Carassiusauratus）、翘嘴红？（Eruthroculterilishaeformis）、虹鳟（Oncorhynchusmykiss）、大西洋鲑（Salmosalar）、金头鲷（Sparusaurata）、黄易鲷（Rhabdosargussarba,）等以较高的支持度形成一个分支。本研究成功地从南方鲇肝胰脏中扩增到长度为688bp(的编码蛋白酶的基因片段，为今后克隆南方鲇GK基因全长序列及该基因在不同营养条件下的表达等研究奠定基础。