草鱼肝胰脏中两种胰蛋白酶的纯化及部分性质的研究

本试验采用硫酸铵分级沉淀和鸡卵类粘蛋白偶联的琼脂糖凝胶亲和层析的方法,从草鱼(CtenopharyngodonIdellus)肝胰脏中提取胰蛋白酶进行纯化,得到两种酶,即胰蛋白酶A(GTA)和胰蛋白酶B(GTB),并对其性质进行了分析。结果表明,两种酶的SDS-PAGE电泳均呈现出单一条带,表明已得到高度纯化,两种酶分子量约为27Kda。以BANPA为底物,测得草鱼胰蛋白酶A(GTA)的动力学常数(Km)为0.37mM。以TAME为底物测得两种胰蛋白酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为8.0,当温度超过60℃,它们不稳定,这两种胰蛋白酶在pH值9.0~11.0时较稳定。