葡萄种子蛋白质双向电泳体系的建立

为了进行葡萄种子蛋白质组学的研究，以葡萄种子为试材，通过对比粗蛋白质不同溶解方法、IPG胶条、上样量、等电聚焦参数以及不同SDS-PAGE分离胶浓度对双向电泳效果的影响，建立了适合葡萄种子的双向电泳体系。结果表明TCA-丙酮提取蛋白质经酚抽提后蛋白质溶解快、杂质少、浓度高，筛选获得17cmpH5~8的IPG胶条，上样量600μg，第一向的聚焦步骤达到80000Vh以及11%的SDS-PAGE分离胶的双向电泳参数，蛋白质分离效果好。所建立的双向电泳体系，适用于不同葡萄品种的种子蛋白质分离。