高通量提取桃树叶片组织基因组DNA的研究

以1个桃树杂交后代群体中不同成熟度的桃叶片组织为试材，以商品试剂盒为对照，采用高通量提取DNA的方法，研究了提取试剂、研磨仪使用钢珠大小和震动频率、时间等参数对提取DNA产物产率、质量的影响。结果表明在常用的CTAB中添加0.3%的抗坏血酸，并提高PVP浓度至4%，NaCl浓度至12%，能有效解决试剂盒提取过程中出现色素及蛋白质、多糖等杂质问题。提取方法和研磨方法优化组合，筛选获得高通量提取不同成熟度桃叶片DNA的方法，表明改良的提取方法采用5mm研磨珠、60s、30次/s或5mm研磨珠、60s、25次/s的研磨预处理，不仅省时省工，适用不同成熟度的桃叶片组织，而且提取效果最好，产率最高，质量符合基因组测序要求。该研究为高效提取DNA提供了技术依据。