刺山柑总RNA提取方法的比较研究

以刺山柑为试材，研究比较了改良SDS提取法、RNApurePlantPlusReagent法、RNAplantPlusReagent法和RNAprepPurePlantKit法提取总RNA的效果，以期寻找一种适于野生刺山柑叶片高质量总RNA最佳提取方法。结果表明4种方法提取的总RNA均可见28S和18S2条电泳谱带，RNAprepPurePlantKit法获得的RNA图谱条带清晰、明亮、稳定，28SrRNA亮度约是18SrRNA的2倍，OD260/OD280为2.00，产率为175.3μg/g，除RNAprepPurePlantKit法能够从叶片中提取到完整性好、纯度高及产率高的总RNA外，其它3种方法提取的总RNA均存在降解及DNA和蛋白等污染，经cDNA-SRAP分析检测，此方法获得的RNA反转录后能扩增出清晰稳定的多态性条带，能够满足后续试验的要求。进一步采用RNAprepPurePlantKit法从刺山柑幼苗整株、根、茎及叶中能够获得高质量的总RNA，因此，RNAprepPurePlantKit法适合刺山柑总RNA的提取。