果实CCoAOMT与LAR基因的筛选与表达分析

以果实为研究材料,探讨了PsCCoAOMT和PsLAR基因在果实不同发育时期的表达动态，采用两步法逆转录与抑制PCR技术相结合的方法构建含果实不同发育时期的均一化全长cDNA文库，通过稀释池PCR法筛选出酚类物质代谢途径中的关键酶基因PsCCoAOMT和PsLAR。结果表明PsCCoAOMT和PsLAR全长cDNA序列分别为1195bp和1625bp，对应的ORF分别为744bp和1050bp，分别编码247和349个氨基酸。PsCCoAOMT相对分子量为27893.8，等电点为5.42，属于亲水性稳定蛋白；PsLAR相对分子量为38483.1，等电点为5.40，具有亲水性，属于不稳定蛋白。同源性分析表明，PsCCoAOMT氨基酸序列与白梨相似性达96%，PsLAR氨基酸序列与蔷薇科植物高度同源。荧光定量结果表明，PsCCoAOMT在整个生长发育过程表达量差异都不明显，整体呈下降趋势，花后50d表达量最低；PsLAR在整个生长发育过程表达量呈明显的下降趋势，前期高后期低，花后125d表达量最低。