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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
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毛尖紫萼藓GH394基因克隆、表达载体的构建
, PP. 113-116
Keywords: 毛尖紫萼藓,抗旱,T-PCR,基因克隆,载体构建
Abstract:
利用PCR技术，以毛尖紫萼藓总RNA为模板，扩增出上、下游分别加入BamHⅠ、SacⅠ酶切位点的GH394（657bp）基因CDS区全长序列，采用pMD18-TVector、pRI101-ANVector构建了该基因克隆、表达载体，并将重组载体质粒转化到大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α和根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)工程菌株GV3101中，并选用X-gal、IPTG和利福平(Rifampicin，Rif)、卡那霉素（Kanamyein，Km）筛选阳性菌株。结果表明已成功构建pMD-GH394克隆载体和pRI101-AN-GH394表达载体并将重组质粒转入目的菌株中；该试验为后续实现毛尖紫萼藓GH394基因抗旱预期功能的验证，奠定了良好的试验基础。
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