全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
投递稿件

查看量下载量

相关文章

更多...
北方园艺  2012 

正交设计优化大白菜ISSR-PCR 反应体系

, PP. 127-129

Keywords: 大白菜,ISSR,正交设计,PCR反应体系？

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

以大白菜为试材，采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取大白菜基因组DNA，采用正交实验设计方法，对dNTPs、Mg2+、Taq-DNA聚合酶、引物、及模板DNA五因素四水平进行优化，筛选并建立了适合大白菜的ISSR-PCR反应体系。结果表明25μL的反应体系中含有1.5mmol/LMg2+、200μmol/LdNTP、0.5UTaq-DNA聚合酶、0.7μmol/L引物、30ng模板DNA。在此基础上探讨了最佳循环次数，应用该优化反应体系，用3个不同循环数对资源DNA进行ISSR-PCR扩增，结果显示优化的反应体系适宜的循环次数是30。？

 References

[1]  Joshi S P,Aggarwal R K,Ranjekar P K,et al.Genetic diversity and phylogenetic rela-tionship as revealed by inter simple sequence repeat（ISSR）polymorphism in the genus Oryza [J].Theoretical and Applied Genetics，2000,100:1311-1320.
[2]  Kojima T,Nagaoka T,Noda K,et al.Genetic linkage map of ISSR and RAPD markers in einkorn wheat in rel-ation to that of RFLP markers[J].Theoretical and Applied Genetics,1998,96:37-45.
[3]  Ratnaparkhe M B,Santra D K,Tullu A,et al.Inheritance of inter-simple sequence rep-eat polymorphisms and linkage with a fusarium wilt resistance gene in chickpea[J].Theoretical and Applied Genetics,1998,96:348-353.
[4]  何正文,刘运生,陈立华,等.正交设计直观分析法优化PCR条件[J].湖南医科大学学报,1998,23(4):403-404. [12]谢运海,夏德安,姜静.利用正交设计优化水曲柳ISSR-PCR反应体系[J].分子植物育种,2005(3):445-450.
[5]  王彦华,侯喜林,徐明宇.正交设计优化不结球白菜ISSR反应体系研究[J].西北植物学报,2004,24(5):899-902.
[6]  Bruno W S.High output genetic mapping of polyploids using PCR-Generated junkers[J].Theor.Appl.Genet.,1993,86：105-112.
[7]  刘威生,冯晨静,杨建民,等.杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建[J].果树学报,2005,22(6):626-629.
[8]  柯桂兰.中国大白菜育种学[M].北京:中国农业出版社,2009.
[9]  朴钟云,吴迪,王淼,等.大白菜抗根肿病近等基因系的分子标记辅助选育[J].园艺学报,2010,37(8):1264-1272. [3]袁鹤,张成合,刘海河,等.大白菜雄性核不育基因的染色体定位及 AFLP 分子标记筛选[J].中国农业科学,2009,42(6):2061-2067.
[10]  沈向群,杨文骏.大白菜核基因显性雄性不育性育性恢复基因的RAPD 标记[J].园艺学报,2004,31(6):731.
[11]  Zietkiewicz E,Rafalski A,Labuda D.Genome fingerprinting by simple sequence repeat（SSR）-anchored polymerase chain reaction amplification [J].Genomics,1994,20:176-183.
[12]  Blair M W,Mccouch S R,Panaud O.Inter-simple sequence repeat(ISSR) amplification for analysis of microsatellite motif frequency and fingerpriting in rice（Oryza sativa L.）[J].Theoretical and Applied Genetics,1999,98:780-792.
[13]  苏小俊,徐海,陈龙正,等.丝瓜种质资源亲缘关系的ISSR分析[J].南京农业大学学报,2010,33(3):42-46.
[14]  姜静,杨传平,刘桂丰,等.桦树ISSR-PCR反应体系的优化[J].生态学杂志,2003,22(3):91-93.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133