人凝血因子IX的线性B细胞表位的预测及鉴定

为预测并鉴定人凝血因子IX（FIX）的线性B细胞表位.通过IEDB数据库及DiscoveryStudio软件预测FIX的B表位和白喉毒素T结构域（DTT）的B表位，用所预测的FIX的B表位替换某预测的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通过基因工程技术制备各重组蛋白，并免疫小鼠，通过ELISA和Western-blot检测抗血清效价和特异性，通过等温量热滴定技术（ITC）测定抗体的亲和力.预测到4个FIX的B表位.用重组蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠产生了识别完整FIX的抗体，该抗体具有良好的特异性，其结合常数KD为106M-1.表明FIX-2（306NAAINKY312）是FIX的B表位，用重组蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能够产生特异性识别FIX且亲和力温和的抗体.？