一种高倍扩增细胞因子诱导杀伤细胞方法

CD3单克隆抗体分别以包被和悬浮的方式刺激人外周血单个核细胞，并以不同的基本培养基(RPMI-1640、IMDM、DMEM/F-12(1∶1)和M199)以及抗氧化剂(2-巯基乙醇和亚硒酸钠)培养细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞，分别测定细胞的扩增、表型(CD3CD56和CD25)和非MHC-限制性毒性(NK毒性和LAK毒性)．结果显示高浓度CD3单克隆抗体包被刺激方式的细胞集落和细胞扩增倍数大于悬浮刺激方式．基本培养基DMEM/F-12(1∶1)的扩增倍数优于其他3种基本培养基．抗氧化剂2-巯基乙醇和亚硒酸钠均有促进CD25抗原形成的作用，亚硒酸钠能提高CIK细胞的毒性，而2-巯基乙醇对于细胞的扩增有促进作用．建立了一种高倍扩增CIK细胞的方法，20d细胞平均扩增倍数可以达到千倍以上．