鳜胰岛素样生长因子-ⅠcDNA全长克隆及组织表达分析

采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法(RACE)等技术克隆了鳜(Sinipercachuatsi)肝组织胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA全长序列。结果表明,鳜IGF-ⅠcDNA全长1784bp,包括5'端非翻译区233bp,3'端非翻译区990bp和开放阅读框561bp,共编码186个氨基酸;前肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中,信号肽44个氨基酸,成熟肽68个氨基酸,E肽74个氨基酸;成熟肽由B、C、A、D4个区域组成,E肽分析表明,鳜IGF-Ⅰ属Ea-4型。鳜IGF-Ⅰ氨基酸序列与其他脊椎动物IGF-Ⅰ氨基酸序列相似度达81%~99%,表明IGF-Ⅰ在脊椎动物进化中较为保守。运用实时荧光定量RT-PCR技术检测了鳜IGF-Ⅰ在成鱼不同组织中的表达水平,其中,肝中表达量最高,肾、脑、后肠、皮肤、性腺表达量次之,胃、脾、前肠、鳃、心、肌肉表达量较低。本研究结果为该基因的时序表达、生长调控等研究奠定了分子基础。