奥利亚罗非鱼髓样分化因子(MyD88)的克隆及其在组织中的表达

髓样分化因子（myeloiddifferentiationfactor88，MyD88）是TLR（toll-likereceptor）信号通路的关键接头蛋白，在先天性免疫中具有重要作用。通过RACE-RCR技术克隆了奥利亚罗非鱼（Oreochromisaureus）MyD88基因cDNA全长序列（GenBank登录号：JN032017）。序列分析表明，奥利亚罗非鱼MyD88基因全长为1611bp，其中包括155bp的5’非编码区，589bp的3’非编码区和867bp的编码区，编码288个氨基酸残基。MyD88蛋白N端具有死亡结构域，C端具有TIR结构域。同源性分析表明，奥利亚罗非鱼MyD88氨基酸序列与鳜鱼（Sinipercachuats）相似性最高，为85.8%，与其他鱼类相似性为70%~82%，与哺乳动物相似性为63%~66%；系统进化树分析表明，奥利亚罗非鱼MyD88与同属鲈形目的鳜鱼、大黄鱼（Larimichthyscrocea）聚在一起。采用实时定量PCR方法检测MyD88在奥利亚罗非鱼各组织中的表达情况。结果显示，MyD88在所有被测组织中都有表达，其中表达量最高的是卵巢，其次在小肠、脾、肝、肾、鳃和血液中有较高的表达量，肌肉、精巢组织中表达量最低。本研究可为进一步探讨MyD88在奥利亚罗非鱼TLR信号通路中的作用奠定一定的基础。