多能性转录因子OCT4和SOX2在体外发育的小鼠2-细胞胚胎的表达与定位

研究的科学问题：探讨多能性转录因子OCT4和SOX2在昆明小鼠（Mus musculus）2-细胞胚胎发育过程中与2-细胞胚胎阻滞发生的相关性。研究方法：本研究应用实时荧光定量PCR 技术检测了小鼠卵母细胞及在M16培养液中培养的不同发育阶段体外受精胚Oct4和Sox2基因的表达，并利用实时荧光定量PCR 和免疫荧光技术比较了2-细胞期胚、2-细胞阻滞胚和4-细胞期胚的OCT4和SOX2的表达与定位。采用ANOVA对实验所得的数据进行分析，P<0.05被认为是具有显著性差异。研究结果：2-细胞期胚只有24.8%发育成4-细胞期胚，75.2%的2-细胞胚发生了阻滞。Sox2和Oct4的mRNA在MII期卵母细胞、原核胚、2-细胞、4-细胞、桑椹胚和囊胚中都有表达。Oct4 mRNA 的表达水平在4-细胞期胚显著高于2-细胞期胚和2-细胞阻滞胚（P<0.05），Sox2 mRNA 的表达水平在2-细胞期胚显著高于2-细胞阻滞胚和4-细胞期胚（P<0.05），而后两者之间没有差异（P< 0.05）。OCT4蛋白在2-细胞期胚和4-细胞胚中与核共定位，但在2-细胞阻滞胚中弥散存在于胞质中。SOX2蛋白在以上3类胚胎中始终定位于细胞核。研究结论：转录因子OCT4和SOX2的表达与定位与小鼠2-细胞胚胎发育阻滞相关，母源性SOX2表达的维持对胚胎合子基因组激活（ZGA）的发生具有重要作用，母源性OCT4的异常定位可能影响了合子基因组激活相关基因的激活，而合子中Oct4的表达影响合子基因组激活后胚胎的发育