一种改进的同步辐射X射线荧光原位分析人肝细胞胞质溶胶内金属蛋白分布的方法

对同步辐射X射线荧光分析技术(SRXRF)原位测定蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离后条带中微量元素的方法做了重要改进.通过增加一个干胶步骤,使得本底材料对光源的康普顿散射明显减弱,本底信号降低到约为湿胶的10%,从而可以用来测定蛋白条带内比锌轻的微量元素的相对含量.所提出的方法有望成为一种具有广泛应用前景的生物样品中微量元素的种态分析方法.对人肝细胞胞质溶胶内金属蛋白分布的研究结果表明:在15～95kDa的范围内有6个含锌蛋白,相对分子量分别为17.5、20.5、27、35、55及63kDa,其中63kDa蛋白为主要的含锌蛋白;此外至少还有4种分子量分别为20、23、43和83.5kDa的含铁蛋白分布于这个分子量范围内.