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分析化学 2009
毛细管电泳法检测肺癌p53基因第七外显子的突变, PP. 1494-1498 Keywords: 肺癌,基因突变,毛细管电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳,单链构象多态性,限制性片段长度多态性 Abstract: p53基因点突变在肺癌的发生过程中起重要作用,检测基因点突变的方法学研究将有助于临床准确诊断肺癌.本实验用PCR扩增包含249位密码子的肺癌及癌旁正常组织p53基因第七外显子,扩增样品分别经96℃变性和HaeⅢ酶切处理,以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP和PAGE-RFLP对其突变情况进行检测,并从上样量、时间、检出限和检出率4个方面进行比较.PAGE凝胶浓度为15%;CE筛分介质PEO浓度3.0%,pH8.2,电压15kV,温度15℃,λex=488nm,λem=520nm荧光检测.检出率由高到低分别为:CE-SS-CP>PAGE-SSCP>CE-RFLP>PAGE-RFLP.CE-SSCP可作为大规模肺癌早期诊断的简便可靠的方法.
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