固绿FCF分光光度法测定血清蛋白质

在pH1.4的Clark-Lubs缓冲介质中,固绿FCF与血清蛋白质作用在室温下能迅速结合形成复合物,其最大吸收波长为660nm,比固绿FCF本身红移了36nm.用分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的新方法.在660nm处各蛋白质浓度至少在5～70mg/L的范围内与吸光度成正比,对测定牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)及球蛋白(IgG)的表观摩尔吸光系数ε660和桑德尔灵敏度s分别为7.87×105、9.52×105、1.60×106L·mol-1·cm-1和0.083、0.072、0.093μg·cm-2.除阴、阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质的测定.所拟方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高等特点,应用于尿液、人血清及含乳饮料中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致.