吡啰红B为底物的氯化血红素催化荧光反应测定葡萄糖

吡啰红B在氯化血红素催化下可被过氧化氢氧化而使其荧光猝灭.在pH5.2弱酸性介质中,稳态催化速率由模拟酶和底物浓度决定,催化体系服从Michaelis-Menten方程,用Lineweaver-Burk作图法求得米氏常数1.4×10-5mol/L,最大反应速度1.9×10-6mol/L·s;催化常数25.6/s.在最佳反应条件下,荧光猝灭程度F0/F与过氧化氢浓度在0.0～7.2×10-7mol/L范围内呈线性关系;检出限为8.0×10-9mol/L.当与葡萄糖氧化酶联用时,可定量检测葡萄糖,线性关系为(0.0～1.0)×10-5mol/L;检出限为3.3×10-8mol/L.方法用于分析人血清中葡萄糖含量,结果与苯酚-4-氨基安替比林法一致.