一种基于巯基化聚丙烯胺自组装膜的免疫传感器固定方法

提出了一种基于巯基自组装的新型蛋白质固定化方法。应用偶联试剂碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)使聚丙烯胺盐酸盐(PAH)与3-巯基丙酸(MPA)偶合,在石英晶振表面自组装,形成一带多氨基的巯基自组装膜。应用该方法成功地固定了羊抗人IgM抗体,并用于人血清免疫球蛋白M(IgM)的测定。详细考察了自组装条件、抗体包被和免疫反应的主要实验条件以及传感器的响应性能。与MPA法比较,应用该方法可在传感器表面固定更多的抗体分子,传感器的响应灵敏度亦更好。在优化的实验条件下,反应的线性范围0.66～26.4mgL;回归方程Y=92.44+12.40X;相关系数r=0.9920。