全二维液相色谱的初步构建及其在山羊血清分离中的应用

以GFC/RP模式构建全二维液相色谱系统,第一维凝胶过滤色谱柱使用ShodexProteinKW-802.5(300mm×8mmi.d.),以0.2mol/LNaH2PO4(pH7.0)的流动相在0.15mL/min的流速下等度洗脱,第二维反相色谱柱使用HypersilBDSC18(35mm×4.6mmi.d.),在3mL/min的流速下梯度洗脱.采用平行柱交替分析的形式作切换接口,2.5min切换一次,两个反相柱交替富集、分析第一维洗脱产物.以5个标准蛋白混合物的分离评价该系统,在单独一维模式中不能分离的样品在全二维液相色谱中得到了较好的分离,二维系统的总峰容量为225.与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率得到较大提高.并用于山羊血清的纯化分析,对一维分离中的重合谱峰进行验证,对制备纯化有一定的实际意义.