高效液相色谱法测定鱼腥草素对鸭肝脂肪酸合成酶活性的影响

利用高效液相色谱法对肉鸭肝脏中参与脂肪酸合成关键酶——脂肪酸合成酶的活性进行分析,并测定了鱼腥草素对鸭肝脂肪酸合成酶活性的影响.采用离心法从鸭肝中分离纯化脂肪酸合成酶,并用鱼腥草素(100mg/L)处理脂肪酸合成酶,然后用HPLC法检测还原型NADPH在340nm处吸收峰变化.HPLC最佳测定条件为:HypersilC18色谱柱,流动相:0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2)-甲醇溶液(80:20,V/V),柱温:25℃,流速:1mL/min,检测波长:340nm,进样量:20μL.HPLC加样的回归方程:A=17754x+123.3,r=0.9945.实验结果表明,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)浓度在0.5μmol/L～1.44mmol/L内线性关系良好.HPLC法检测鸭肝脂肪酸合成酶的活性,样品用量少,准确度高.