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ISSN: 2333-9721
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分析化学  2011 

基于丙酮酸/还原型辅酶Ⅰ/乳酸脱氢酶/氧化型辅酶Ⅰ/乳酸正逆反应同时测定丙酮酸/乳酸的酶荧光毛细管分析

, PP. 1058-1064

Keywords: 荧光毛细分析,丙酮酸,乳酸,乳酸脱氢酶,血清

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Abstract:

利用丙酮酸(PA)/还原型辅酶I(NADH)/乳酸脱氢酶(LDH)/氧化型辅酶I(NAD+)/乳酸(LA)荧光反应体系的正逆反应,建立了一种可直接用于临床检验、能同时测定血清中微量PA/LA的酶荧光毛细管分析法。本方法可在常规荧光光度计上,用普通玻璃毛细管同时实现了PA/LA的高灵敏分析,每次分析试剂和样品的用量仅9μL,而且方法重现性好,血清样品预处理操作简单。得到的最佳条件:60μmol/LNADH,100U/LLDH,3mmol/LNAD+,测定乳酸的pH值为9.0、丙酮酸的pH值为7.5,反应时间10min;LA的线性范围是0.05~1.0mmol/L;检出限为0.023mmol/L;RSD<1.6%;PA的线性范围是4~80μmol/L;检出限为0.73μmol/L;RSD<1.3%;血清中PA和LA的添加回收率在94%~105%之间;测定结果与常规紫外分光光度法一致。

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