同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中的芥子气水解产物

应用同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量检测血浆中芥子气水解代谢产物硫二甘醇(TDG)和二羟乙基亚砜(TDGO)的方法。应用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀染毒大鼠血浆中蛋白,采用ZORBAX-C18色谱柱(100mm×3.0mm,3.5μm),以5mmol/L甲酸铵-甲醇梯度洗脱分离待测物。以d8-TDG为内标,在正离子多反应监测模式下定性和定量分析TDG和TDGO。方法学验证结果表明,TDG在5-800μg/L和TDGO在0.5-80.0μg/L范围内均呈良好的线性关系(r2＞0.991),定量限分别为5和0.5μg/L,加标回收率在101%-118%之间,方法的日内和日间精密度(RSD)均小于10%。对SD大鼠(n＝6)采用皮下注射方式进行染毒后采样测定,代谢动力学参数计算结果显示,TDG和TDGO的达峰时间(tmax)分别为30和60min,峰值浓度(cmax)为(1724±227)μg/L和(301±115)μg/L,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)为(3286±249)μg·h/L和(1010±363)μg·h/L。