高效液相色谱分析鱼毒性藻类海洋卡盾藻溶血毒素

采用高效液相色谱技术(HPLC)分离和分析了海洋卡盾藻(香港株)溶血毒素的甲醇粗提物,通过对比不同流动相、检测波长、等度和梯度洗脱方式,初步建立了分析其溶血毒素的HPLC方法。结果表明,采用梯度洗脱的方法,海洋卡盾藻溶血毒素的粗提物在50min内取得了较好地分离。色谱条件为C8硅胶柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈和水,梯度洗脱(0-10min,60%→80%乙腈;10-40min,80%→90%乙腈;40-50min,90%乙腈);紫外检测器检测波长为205和448nm;流速为0.8mL/min;柱温为25℃。用兔血红细胞法对各个主要色谱峰进行溶血活性检测显示,海洋卡盾藻(香港株)的溶血毒素至少含有5种成分。光谱分析显示一种成分的紫外吸收高峰在448nm,一种未完全分离的混合组分的紫外吸收高峰为440和446nm,另外3种成分的紫外吸收高峰为205nm。