在线固相萃取-液相色谱串联质谱法测定阿姆西汀异构体的药代动力学差异

建立了在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法(On-lineSPEHPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中S/R-阿姆西汀手性异构体的方法.血浆样品经过以下预处理步骤:采用甲醇-乙腈(50:50,V/V)沉淀蛋白;应用On-lineSPE将血浆样品中的其它杂质去除;将保留在SPE柱上的阿姆西汀和内标洗脱后用分析柱进一步分离.分离后再用串联质谱法分别测定大鼠血浆中S/R-阿姆西汀的含量.SPE柱为RetainPEPJavelin(10mm×2.1mm);分析柱为ZORBAXSB-C18(50mm×2.1mm×3.5μm).质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,检测离子为正离子,分别选择m/z292.1/154.0和260.4/116.2作为S/R-阿姆西汀和内标(普萘洛尔)的检测离子对.结果表明,S/R-阿姆西汀的线性范围为0.2-1000μg/L,相关系数R分别为0.9903和0.9951,批内精密度RSD分别为1.2%-12.0%和0.4%-11.2%,回收率分别为94.2%-101.6%和94.3%-109.4%之间.本方法显著提高了阿姆西汀的检测灵敏度,可以满足大鼠灌胃给予阿姆西汀两种异构体的药代动力学研究要求.