虾过敏原Pena1抗原表位的关键氨基酸分析

建立了一种利用表位抗体筛选虾过敏原Pena1抗原表位中关键氨基酸的方法.利用生物信息学软件MEGA5计算Pena1中表位的氨基酸组成和出现频率,并采用DNAMAN软件对SDAP数据库中致敏食物原肌球蛋白的氨基酸保守性分析,综合两种方法筛选出各表位可能的关键氨基酸,Epitope1:K,E,N;Epitope2:K,L,E;Epitope3:E,R,D,L,Q;Epitope5:K,L,Q.用丙氨酸取代并合成突变多肽.利用表位抗体,通过竞争性免疫斑点法及间接ELISA方法检测突变多肽的抗体结合能力,筛选出各表位的关键氨基酸.分别为:Epitope1:谷氨酰胺;Epitope2:亮氨酸和谷氨酸;Epitope3:亮氨酸和天冬氨酸;Epitope5:亮氨酸.实验结果证明了此种筛选关键氨基酸的方法的可行性,为Pena1致敏机理的研究及利用基因修饰脱敏提供了一定的理论依据.