阳离子铝酞菁-黏多糖缔合物荧光探针测定生物样品中的溶菌酶

在弱酸性介质中，具有红区发射特性的强荧光化合物阳离子铝酞菁（TTMAAlPc）在带磺酸基团的低浓度阴离子黏多糖（肝素，HP）的存在下，发生诱导聚集，导致酞菁荧光几乎完全猝灭。此聚集缔合物可作为溶菌酶的荧光底物，在溶菌酶的水解作用下，HP降解为小分子片段，破坏了TTMAAlPc的诱导聚集行为而使其释放，体系荧光显著恢复。据此现象，建立了测定溶菌酶的新方法。结合荧光光谱与荧光各向异性技术对反应机理进行了探讨。确定了最佳反应条件（醋酸缓冲体系，pH4.0、反应温度70℃、反应时间30min），考察了共存物质的影响。在最佳条件下，方法的线性回归方程为y=-30.12121+214.65772x，r=0.99871，线性范围为0.2~2mg/L，检出限0.015mg/L。本研究操作简便且有较好的选择性和灵敏度。本方法用于溶菌酶实际样品的测定，并与常规的比浊法进行了比较，结果符合良好。本研究将阳离子金属酞菁荧光探针用于酶分析，开拓了酞菁荧光探针的应用范围。