基于砷和汞离子标记SiO2@Au纳米探针的超敏多元免疫分析方法研究

构建了一种基于As3+和Hg2+标记SiO2@Au复合纳米探针（NPs），以及氢化物发生-原子荧光（HG-AFS）同时检测癌胚抗原（CEA）和糖蛋白19-9（CA19-9）的超灵敏多元免疫分析方法。采用氨基化SiO2（核）@AuNPs（壳）分别吸附As3+和Hg2+，并标记CEA和CA19-9的第二抗体（Ab2），由此获得了富As（或Hg）型信号探针（As（Hg）-SiO2@Au-Ab2）。基于夹心免疫分析方法，将两种信号探针和对应的抗原以及96孔板上一抗，在板底形成两种免疫复合物（Ab1/Ag/As（Hg）-SiO2@Au-Ab2），利用HG-AFS同时检测As3+和Hg2+，其与CEA和CA19-9的含量对数值成正比，可用于定量分析。此类探针不仅具有良好的分散性、还具有出色的信号放大效果。优化了探针合成和最佳反应条件，并对探针制备过程进行了表征。本方法与CEA和CA19-9分别在0.001~100μg/L和0.01~80U/mL范围内呈线性关系，检出限分别为0.5ng/L和0.005U/mL（3σ），低于标准ELISA方法3个数量级。用于血清样品中CEA和CA19-9同时检测，并与标准ELISA方法对照，结果一致。此免疫分析方法灵敏、简便、一次可实现多个肿瘤标志物检测，适合于基层卫生部门进行恶性肿瘤早期筛查。