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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
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基于愈创木酚荧光减量准确测定过氧化物酶活性的新方法
DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150115, PP. 1040-1046
Keywords: 过氧化物酶,愈创木酚,荧光,白萝卜提取液
Abstract:
利用H2O2/过氧化物酶(POD)/愈创木酚(GA)反应体系的产物(470nm)吸光度去定量POD活性是目前常用方法之一,但产物不稳定且对比色皿有吸附现象是该反应的主要缺点之一。为了解决此问题,本研究利用GA的荧光特性建立了一种能准确测定POD活性的方法。用辣根过氧化物酶(HRP)作为测试样品得到了以下优化条件:0.5mmol/LGA,0.5mmol/LH2O2,0.05mol/LPBS缓冲液(pH6.0),反应温度20℃,样品耗量20μL;本方法的线性范围为500~60000U/L(r=0.9993),RSD≤2.4%(n=11),检出限为385U/L。在优化条件下,用白萝卜提取液作为测试样品,用本方法((9714±132)U/L)与比色法((9926±352)U/L)和循环催化流动分析法((9608±456)U/L)进行了对比,结果表明,3种方法相互一致性很好。
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