丹参诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的突触功能研究

目的探讨由丹参诱导骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）定向分化的神经细胞是否具有突触循环功能。方法采用优化诱导方案对4～5代状态好的MSCs进行反复多次诱导，终止诱导后分别进行免疫荧光细胞化学、细胞内钙离子流及突触功能检测。以50mmol/LKCl作为诱发动作电位的刺激因子，采用激光共聚焦显微镜(LSCM)对Fluo-3/AM和SynaptoRedC-2荧光探针进行荧光激发，检测分化神经细胞在细胞外高钾刺激下细胞内钙流及细胞突触功能。结果4次诱导5h后，神经样细胞伸出突起并交互成复杂网状；免疫荧光细胞化学显示4次诱导5h后TUJ-1表达率为(96.7±2.8)%，突触小泡蛋白(synaptophysin)表达率为(96.2±2.1)%；LSCM显示4次诱导5h后细胞在高钾刺激下细胞内钙流增加，细胞突触发生胞吞胞吐。结论丹参可高效快速诱导MSCs分化为神经细胞，此细胞具有正常的突触循环功能。