Geminin在血管平滑肌细胞分化表型转化中的介导作用

目的通过比较静止状态的血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells,VSMCs）与血清刺激后的VSMCs在分化表型改变中Geminin的表达变化情况，探讨Geminin对VSMCs表型转化的影响。方法实验设置静止状态（血清饥饿）对照组、血清刺激组，研究不同时相两个组Geminin的分布、活性及表达水平的差异。血清饥饿法可以诱导出VSMCs表型分化及活性差异；免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察Geminin核内定位；应用PCR检测Geminin基因表达的变化；Westernblot检测Geminin蛋白、VSMC合成型标志物骨桥蛋白（osteopontin，OPN）及收缩型标志物平滑肌肌动蛋白相关蛋白（actin-relatedproteins，ARP）表达的变化。结果①静止状态下（血清饥饿）VSMCs以收缩型为主，血清刺激后以合成型为主；②静止状态Geminin几乎全部存在于细胞质内，而血清刺激后Geminin几乎全部定位于胞核内；③GemininmRNA在血清刺激时明显升高，且在刺激48h时差异表达最明显,与无血清比较差异具有统计学意义(P<0.05)；④Geminin蛋白和骨桥蛋白在血清刺激时均明显升高，与无血清比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Geminin参与介导了VSMCs由收缩型向合成型的转化。