5-氮-2′-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对人肺腺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响

目的探讨DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-dC）联合组蛋白去乙酰化抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人肺腺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响。方法人肺腺癌细胞株A549细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养液培养。实验分4组，5-aza-dC组：细胞接种20h后，加入5μmol/L的5-aza-dC；TSA组：细胞接种20h后，加入300nmol/LTSA；5-aza-dC+TSA组：细胞接种20h后，加入5μmol/L5-aza-dC，24h后再加入300nmol/LTSA；对照组：DMEM培养液中加入等量的二甲基亚砜(DMSO)。MTT比色法测定各处理因素对A549细胞生长的影响；AnnexinV/PI双染法测定各组细胞培养72h后的凋亡情况；应用RT-PCR检测各组细胞培养72h后细胞CCAAT增强子启动蛋白α（C/EBPα）mRNA的表达。结果（1）5-aza-dC及TSA呈时间依赖性地抑制A549细胞的生长，而在同一时间不同组别比较联合用药组细胞生长抑制率较单用药组明显增加[12h:35.51%vs21.63%,19.59%;24h:43.19%vs32.39%,30.60%;36h:54.85%vs38.83%,37.35%;48h:60.69%vs45.79%,43.84%;60h:68.92%vs50.60%,50.20%;72h:74.54%vs59.23%,57.82,P<0.05];（2）5-aza-dC和TSA能够诱导A549细胞凋亡，且联合用药组A549细胞凋亡率（75.35±1.46）%明显高于5-aza-dC（49.76±1.32）%（P<0.05）和TSA组（50.88±1.06）%（P<0.05）；（3）5-aza-dC和TSA能够上调C/EBPαmRNA的表达，联合用药组中C/EBPαmRNA表达量（0.581±0.024）明显高于5-aza-dC组（0.402±0.016）（P<0.05）和TSA组（0.394±0.031）（P<0.05），有统计学意义；（4）5-aza-dC组与TSA组在抑制A549细胞生长、诱导细胞凋亡、增强C/EBPαmRNA的表达方面比较，差别均无统计学意义（P>0.05）。结论与单用5-aza-dC或TSA相比，联合应用两种药物能够更好的抑制人肺腺癌A549细胞的增殖、诱导细胞凋亡和增强C/EBPα基因mRNA的表达。