米诺环素对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的保护作用

目的探讨米诺环素对大鼠蛛网膜下腔出血（subarachnoidhemorrhage，SAH）后早期脑损伤（earlybrain？injury？,EBI）的保护作用及其机制。方法健康4月龄雄性SD大鼠48只，体质量250～300g，按随机数字表法分为假手术组（sham组）、SAH组、安慰剂组（vehicle组）和米诺环素组（minocycline组），每组各12只。采用经视交叉前池注血法建立蛛网膜下腔出血模型。各组于处理后24h经HE染色观察海马CA1区神经元形态；运用Westernblot和明胶酶谱方法检测大鼠海马基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase-9,MMP-9）的表达；采用原位末端标记法（TUNEL）检测海马神经元凋亡。结果HE染色显示：SAH组大鼠海马CA1正常神经元数量（67.42±20.35）个较sham组（145.5±21.23）个明显下降（P<0.01），米诺环素组正常神经元数量（125.73±24.67）个较SAH组明显增加（P<0.01）。Westernblot检测结果显示：sham组大鼠海马MMP-9蛋白表达水平较低（1.94±0.39）%，SAH后24hMMP-9表达明显增高[（103.60±7.72）%，与sham组相比明显升高，P<0.01]；米诺环素组MMP-9蛋白表达明显降低[（74.52±6.47）%，较SAH组明显降低（P<0.01）]。明胶酶谱检测显示：sham组大鼠海马未检测到活性[（0.39±0.23）%]、SAH组MMP-9活性（201.81±6.31）%较Sham组明显增高（P<0.01）；米诺环素组MMP-9活性（148.96±6.02）%较SAH组明显降低（P<0.01）。TUNEL检测显示：sham组海马神经元未检测到TUNEL阳性细胞，SAH后24h海马TUNEL阳性细胞数明显增加[（192.17±6.31）个]，与sham组相比差异有统计学意义（P<0.01）；米诺环素组凋亡阳性细胞数（91.17±7.78）个较SAH组明显下降（P<0.01）。结论大鼠蛛网膜下腔出血后，米诺环素能够改善大鼠海马神经元形态，对早期脑损伤发挥保护作用；其机制可能与米诺环素抑制MMP-9活性及其蛋白表达，减轻海马神经元凋亡有关。