降低蛋白激酶D3的表达和活性增强前列腺癌细胞DU-145对依托泊甙的敏感性

目的探讨蛋白激酶D3（proteinkinaseD3，PKD3）是否会影响依托泊甙对激素抵抗性前列腺癌(hormonalrefractoryprostatecancer,HRPC)的生长抑制。方法在HRPC细胞系DU-145中瞬时转染PKD3的siRNA，Westernblot检测细胞中内源性PKD3的表达变化；siRNA转染48h后，分别以0、30、70、100、300μmol/L的依托泊甙处理对照siRNA、siRNA-PKD3-1、siRNA-PKD3-2转染的DU-145细胞24h,并以细胞活力测定观察敲定内源性PKD3的表达有无影响依托泊甙对DU-145的生长抑制；利用PKC单一抑制剂、PKC-PKD双重抑制剂处理DU-145细胞，以观察二者是否增强DU-145对依托泊甙的敏感性。结果Westernblot证实siRNA-PKD3的转染敲低DU-145细胞内源性PKD3的表达；细胞活力测定表明，在非特异性siRNA（si-CTL）转染的DU-145细胞中，依托泊甙剂量依赖地抑制DU-145细胞的生长，而敲低PKD3的表达不仅可显著抑制DU-145的生长（P<0.01），还可显著增强依托泊甙对DU-145生长的抑制（P<0.01）；Go6976（PKC-PKD的双重抑制剂）可明显抑制前列腺癌DU-145细胞生长（P<0.01），而Go6983（单一的PKC抑制剂）则仅对DU-145的生长起微弱抑制作用。结论PKD3的表达和活性可增强前列腺癌DU-145细胞对依托泊甙的敏感性,提示可作为抗前列腺癌药物设计的潜在靶点之一。