零下非结冰UW液成功保存生物人工肝用L-02肝细胞

目的比较零下非结冰（-0.8℃）与常规低温（4℃）分别用于人工肝用永生化L-02细胞保存的效果，探索零下非结冰保存肝细胞与细胞凋亡的关系。方法制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为以下2组：-0.8℃组（零下非结冰组），4℃组（对照组）。低温保存24、48h及72h后，分别测定细胞存活率、凋亡率、坏死率（流式细胞术）及ALT释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能。结果-0.8℃（零下非结冰）较4℃明显提高了长时间低温保存L-02细胞的存活率[72h：（70.17±2.82）%vs（60.05±3.17）%，P<0.01]，降低了细胞凋亡率[72h：（5.73±1.68）%vs（9.20±2.35）%，P=0.02]，抑制了ALT释放[72h：（6.21±0.65）U/Lvs（8.68±1.18）U/L，P<0.01]，更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72h：（1.01±0.14）mmol/Lvs（0.66±0.09）mmol/L，P<0.01]及白蛋白分泌功能[72h：（9.04±0.53）μg/mlvs（7.70±0.52）μg/ml，P<0.01]。2组间细胞坏死率差异无统计学意义[72h：（18.45±1.88）%vs（21.82±3.86）%，P>0.05]。结论零下非结冰可明显维持L-02细胞存活率，降低低温损伤引起的细胞凋亡，有效保护肝细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。