慢性机械压力诱导气道上皮黏蛋白5AC的表达

目的探讨慢性机械压力能否诱导气道上皮黏蛋白（mucin，MUC）5AC表达及通过的相关信号通路。方法培养大鼠气道上皮细胞建立气液相界面（airliquidinterface，ALI），通过对Transwell培养板上的气道上皮细胞每天施加10、20、30cmH2O水平的气体压力1h并持续7d来模拟慢性机械压力作用，并以表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）特异性抑制剂AG1478、细胞外信号调节激酶（extracellularsignalregulatedkinase,ERK）激酶抑制剂PD98059分别作为干预因素处理细胞。将细胞分为空白对照组、单纯压力组、AG1478+30cmH2O压力组、PD98059+30cmH2O压力组，单纯压力组分为10、20、30cmH2O3个压力水平。RT-PCR检测MUC5ACmRNA表达水平，ELISA法检测MUC5AC蛋白含量，Westernblot检测磷酸化ERK（p-ERK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（phosphorylatedc-JunN-terminalkinase，p-JNK）和磷酸化P38（p-P38）水平。结果与空白对照组比较，单纯压力组MUC5AC蛋白及mRNA表达水平随压力水平的升高而升高（P<0.05），呈压力依赖性，同时伴随p？ERK蛋白含量增加（P<0.05），但p-JNK和p-P38含量没有明显变化（P>0.05）。30cmH2O压力水平MUC5AC蛋白及mRNA表达水平[（0.65±0.09）、（0.62±0.04）]明显高于空白对照组[（0.28±0.04）、（0.20±0.05），P<0.01]，p-ERK蛋白含量（0.68±0.05）较空白对照组（0.27±0.07）显著增加（P<0.01）。应用AG1478和PD98059分别预处理后，MUC5AC蛋白、mRNA表达水平及p-ERK蛋白水平在AG1478+30cmH2O压力组分别为（0.39±0.08）、（0.40±0.06）、（0.25±0.04），PD98059+30cmH2O压力组分别为（0.36±0.09）、（0.38±0.13）、（0.26±0.11），与单纯压力组30cmH2O水平比较均显著降低（P<0.05）。结论慢性机械压力能诱导气道上皮MUC5AC表达增加，这一作用可能通过机械压力压缩侧面胞间隙来实现，而EGFR及ERK信号通路参与其中。？