几丁糖对高糖腹透液刺激大鼠腹膜间皮细胞TGF-β1表达的影响

目的探讨高糖腹透液（4.25%）对大鼠二代腹膜间皮细胞TGF-β1表达的影响及几丁糖(chitosan)的干预作用。方法取第2代鼠腹膜间皮细胞（ratperitonealmesothelialcells,RPMC）（经细胞形态和免疫组化鉴定），随机分为4组（n=4），A组即对照组：DMEM/F12培养基培养；B组：DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液；C组：DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液+几丁糖1.2mg/L；D组：DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液+几丁糖0.4mg/L。培养24h收集细胞提取RNA，48h收集细胞提取蛋白，RT-PCR检测腹膜间皮细胞TGF-β1mRNA的表达。Western印迹检测TGF-β1的蛋白表达。结果①RPMC经高糖腹透液（4.25%）刺激后，TGF-β1mRNA和蛋白的表达均上升，与0h比较，TGF-β1mRNA和蛋白的表达分别于24、48h时达到高峰，A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05)；②24h时，几丁糖使TGF-β1mRNA的表达下降明显(P<0.05)，B组分别为A组的2.51倍、C组的2.13倍、D组的1.68倍，D组为C组的1.26倍且抑制程度与几丁糖浓度呈正相关（r=0.948,P<0.01）。48h时，几丁糖使TGF-β1的蛋白水平下降明显，B组分别为A组的1.85倍、C组的1.52倍、D组的1.24倍，D组为C组的1.23倍。C、D两组分别与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)，且抑制程度与几丁糖浓度呈正相关（r=0.831,P<0.05）。结论①高糖腹透液可刺激RPMCTGF-β1mRNA和蛋白表达上调；②几丁糖可抑制腹膜纤维化的中枢性因子TGF-β1表达的活性。