TLR4及MD2反义基因对内毒素诱导的肺泡Ⅱ型细胞活化的影响

目的观察Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)及myeloiddifferentiationprotein2（MD2）反义基因对内毒素（lipopolysaccharide，LPS）诱导的肺泡Ⅱ型细胞NF-κΒ活化的影响。方法培养的肺泡Ⅱ型细胞分为：正常细胞（对照）组、LPS组、LPS+转染空载体组、LPS+转染TLR4反义基因组、LPS+转染MD2反义基因组、LPS+转染TLR4-MD2反义基因组（n=8）。Northernblot检测转染细胞的TLR4及MD2mRNA表达，Westernblot检测转染细胞TLR4及MD2蛋白表达，电泳迁移率改变法检测NF-κΒ的活性，ELISA测定细胞培养上清中TNF-α和IL-6含量。结果与对照组比较，LPS刺激后的细胞TLR4及MD2mRNA和蛋白表达、NF-κΒ活性、TNF-α和IL-6的生成均显著增加（P<0.01）；而转染反义基因组细胞与其他LPS刺激组比较，TLR4及MD2mRNA和蛋白的表达、NF-κΒ活性及TNF-α和IL-6的含量均明显降低（P＜0.01）。结论TLR4及MD2反义基因能有效抑制LPS诱导的肺泡Ⅱ型细胞的活化。