TNF-α对家兔内毒素休克钙敏感性的影响及其与Rho激酶和蛋白激酶C的关系

目的观察肿瘤坏死因子α（tumornecrosisfactorα,TNF-α)对内毒素休克血管钙敏感性的影响及其与Rho激酶和蛋白激酶C（proteinkinaseC,PKC）的关系。方法取正常和内毒素休克家兔肠系膜上动脉（superiormesentericartery,SMA），采用离体血管环张力测定技术，用去极化状态下（120mmol/LKCl）SMA血管环对梯度浓度钙的收缩力反映血管的钙敏感性。用ELISA法测定血浆炎性因子TNF-α的水平，观察TNF-α对SMA血管环钙敏感性的影响及与PKC和Rho激酶的关系。结果家兔LPS(1mg/kg)静脉注射后，早期（即LPS注射后30min和1h）SMA血管环对钙的反应性升高，量-效曲线左移，最大收缩力（Emax）升高（P>0.05）；随着时间的延长，SMA血管环对钙的反应性逐渐下降，到LPS注射后6h明显降低，其量-效曲线明显右移，最大收缩力（Emax）明显降低（P<0.01）。家兔LPS(1mg/kg)静脉注射后2h，血清中TNF-α的水平逐渐升高，4h达到高峰，6h有所降低但仍高于正常组（P<0.05，P<0.01），其变化趋势与血管钙敏感性变化呈一定负相关关系（r=－0.6753）。低浓度的TNF-α（20ng/ml）孵育可明显升高SMA对钙的反应性，高浓度的TNF-α（200ng/ml）可明显降低SMA对钙的反应性（P<0.05，P<0.01）。Rho激酶特异性抑制剂Y-27632（1×10－5mol/L）可明显降低低浓度的TNF-α升高SMA对钙的反应性（P<0.05，P<0.01）；而PKC的抑制剂Staurosporine（1×10－7mol/L）无拮抗作用（P>0.05）。？结论？TNF-α对内毒素休克血管的钙敏感性有重要的调节作用，其调节作用可能主要与Rho激酶有关，与PKC关系不大。