中国恒河猴Mamu-B*1703/EGFP在K562和B16细胞中的表达及分布

目的分析恒河猴主要组织相容性复合体（majorhistocompatibilitycomplex，MHC）Ⅰ类分子重链的亚细胞分布，建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562和B16细胞，细胞收集后以W6/32单克隆抗体或抗Mamu-B*1703抗血清及PE标记二抗染色，利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析Mamu-B*1703复合体在细胞内和细胞表面的表达。结果在K562和B16细胞的细胞质内均可观察到与Mamu-B*1703重链基因融合表达的绿色荧光蛋白激发后的绿色荧光，即2种细胞均可表达外源Mamu-B*1703重链分子；但通过藻红蛋白标记的抗MHCⅠ类分子复合体抗体染色显示，Mamu-B*1703复合体仅表达于K562细胞表面，而不表达于B16细胞表面。结论Mamu-B*1703重链可与人K562细胞而不能与小鼠B16细胞内的β2m轻链结合组装成复合体，表达于细胞表面，提示研究恒河猴的MHCⅠ分子表达应利用人类的细胞株。？