乌司他丁对TNF-α作用的A549细胞EnaC-βmRNA和蛋白表达的影响

目的通过研究乌司他丁对TNF-α作用的A549细胞ENaC-β转录和翻译水平的影响。方法将A549细胞分组为空白组、乌司他丁组、TNF-α组和乌司他丁+TNF-α组，TNF-α浓度为100ng/ml，各组作用时间均为6、12、24h。乌司他丁组及乌司他丁+TNF-α组在12h时间点上分别用1250、2500、5000U/ml3种浓度乌司他丁作用A549细胞，采用浓度5000U/ml乌司他丁分别作用6、24h，RT-PCR半定量检测ENaC-βmRNA表达量，Westernblot半定量检测ENaC-β蛋白浓度。结果①在作用不同时间后，乌司他丁对ENaC-βmRNA和蛋白表达水平的影响与空白组比较差异无统计学意义（P>0.05）。②5000U/ml乌司他丁+TNF-α组分别作用6、12、24h后ENaC-βmRNA及蛋白表达较TNF-α组均明显升高（P<0.01）。③作用12h后，各浓度乌司他丁+TNF-α组ENaC-βmRNA及蛋白表达较TNF-α组均明显升高（P<0.01），且各浓度组间ENaC-βmRNA及蛋白表达差异也有统计学意义（P<0.05）。结论乌司他丁不能直接上调A549细胞ENaC-β转录和翻译水平，但能以浓度依赖方式对抗炎症反应对ENaC-β表达的抑制作用。